| Sprog : |
|
| Encyclopedia samfund |Encyclopedia Svar |Indsend spørgsmål |Ordforråd Viden |Upload viden |
Polyacrylamidgelelektroforese |
 |
|
Hovedsageligt på grund af den mellemliggende del af gelen forårsaget af ujævn størkning, for det meste i tyk gel. Fremgangsmåde: lad det fuldt størknede yderligere opfølgning eksperimenter. ⒍ "panderynken" (ned midt på begge sider mønstre) form med fornuft? Hovedsageligt i lodret protein elektroforese tank, sædvanligvis i bunden af kløften mellem pladerne ikke udelukket bobler ren.Fremgangsmåde: Du kan tilføje den rigtige mængde mellem de to plader buffer for at fjerne luftbobler. Hvorfor ⒎ bands optrådte udtværing? Prøverne er hovedsagelig ineffektive eller separationsgel smeltning forårsaget af uforholdsmæssigt store koncentrationer. Fremgangsmåde: pipettering før centrifugering vælge den passende prøve buffer, tilsættes passende mængde prøve chaotropisk, elektroforese buffer er for lang, rekonstitueret, reducerende gel koncentration. Hvorfor ⒏ fænomen teksturer vist? Uopløselige partikler prøve er primært forårsaget. Fremgangsmåde: pipettering før centrifugering, plus mængden af prøven og fremme opløsningsmidler. ⒐ Hvad er en "ghost bandet", hvordan man skal håndtere? "Ghost band" er at køre komplekse makromolekylære konformation af proteinet molekyle, ofte forekommer i lane til toppen (undertiden koncentreret gel) nogle af de makromolekyler ukendte bands eller prøve hul i bunden af nedbør, hovedsagelig på grund af det reducerende middel i varmesystemet færd med at blive oxideret og mister aktiviteten, hvilket oprindeligt dissocieret bindende Proteingenfoldningstrin og re-knytte underenheder, polymeriseret i store molekyler, den molekylære vægt end målet band, og nogle gange kan ikke komme ind i separationsgel. Men det er det samme med det mål immunologiske aktivitet, kan reaktionen ses i WB med sit mål bånd tilsvarende antistof effekt. Approaches: opvarmes til kogning, og tilføj derefter mængden af Beta-mercaptoethanol eller DTT, et reduktionsmiddel for at supplere manglen eller mængden af EDTA kan tilsættes for at forhindre oxidation af reduktionsmiddel. ⒑ Hvorfor kan ikke afspille bromphenolblåt tegn på? Vi mødtes på Central Stående Komité bromphenolblåt eksperiment har kørt ud af bundpladen, men proteinerne er endnu ikke kørt ned fænomen. Primært med puffer og koncentrationen af gelen. Fremgangsmåde: erstatte korrigere pH Buffer, mindskelse gel-koncentrationer. Hvorfor elektroforese bands ⒒ meget tyk? Meget tyk strimmel elektroforese er en fælles ting, for det meste gode grunde, ikke koncentreret. Fremgangsmåde: hensigtsmæssigt at øge længden af stabelgelen, stacking gel reservoir at sikre korrekt pH (6,7), på grund af lavere spænding; Hvorfor ⒓ højspænding elektroforese og den nuværende er meget lav det? Dette fænomen er generelt tilbøjelige til begyndere. Såsom spænding 50v eller derover, men i den nuværende 5mA kan være mindre. Hovedsageligt på grund af elektroforese tanken ikke er korrekt monteret, er den nuværende sti ikke er dannet. Medtag: en ekstern tank, monteret baglæns b Udenfor badet er for lille c Elektroforese tankbund isolator ikke fjernes (fx omvendt plast med gummihud).... Fremgangsmåde: elektroforese tank kan monteres korrekt. ⒔ stacking gel og gel fraktur, der er luftbobler mellem pladerne på elektroforese påvirke dig? Det skete primært i begyndere i almindelighed, på elektroforese vil ikke have meget effekt. Førstnævnte skyldes primært ujævn eller overdreven trækkraft forårsaget af kam, sidstnævnte skyldes ophævelsen af gummigreb, er bestyrelsen ikke trykket forårsagede luften ind i årsagen. ⒕ gel på det forkerte tidspunkt, eller langsom eller hurtig, hvordan er det? Normalt inden for lim i 30MIN-1H kondensat. Hvis kondensatet er for langsom, kan det TEMED, APS dosis er ikke nok eller svigte. APS bør nu med den aktuelle, TEMED ustabil, let oxideres til gul. Hvis du hælder for hurtigt, kan det være for stor mængde APS og TEMED, så lim for hårdt og let at knække, brænde gelelektroforese og nemt. ⒖ elektroforese er længere end normalt? Og gelen puffersystem kan effektniveau PH buffer system til det forkerte valg, bufferen, og det isolerede materiale til PH isoelektriske punkt forskellen er for lille eller for høj ionstyrke buffer system. ⒗ efter separationsgel plus hvorfor skulle straks tilføje vand? |
| Bruger Anmeldelse |
|
Ingen kommentarer endnu |
